2.6 指纹图谱建立及分析
2.6.1 指纹图谱的建立鹃素建立
取“2.1”项的对照品溶液和“2.2”项下供试品溶液,按“2.3.1”项的满山色谱条件,使用高效液相色谱仪检测。红叶含量所得满山红叶HPLC对照图谱见图4,指纹15批满山红叶色谱叠加图见图5。图谱
图4所示,并测该指纹图谱找到10个共有峰,定杜通过与对照品色谱图对比,建立鹃素确认10号峰为杜鹃素,满山并将9号峰作为参照S峰。红叶含量
2.6.2 相似度分析
采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件”(2012版),指纹采用中位数法依次进行15批满山红叶指纹图谱的图谱相似度评价,结果见表9。并测根据表9能够得出,定杜15批满山红叶纹图谱整体相似度在0.986~0.999,建立鹃素均>0.9,具有较高的一致性。
2.6.3聚类分析
将15批满山红叶的10个共有峰峰面积导入SPSS 20.0,运用平均欧式距离法,进行聚类分析,见图6。分类结果表明不同产地满山红药材在分类距离上较远,即使同一产地其分类距离也存在明显差异性。初步分析,可能与满山红药材采摘时间、贮存方式、气候等有关。15批满山红叶在产地和批次上其主化学成分种类具有代表性,指纹图谱能够反映出样品的全貌。
3 讨论
本实验供试品的制作方法,考察了不同提取溶剂和提取方式对满山红叶指纹图谱的影响。在提取溶剂方面,选取了水、60%甲醇、稀乙醇三种溶剂作为提取溶剂,结果发现,满山红冻干粉在三种溶剂中的溶解度都很好,但是以水作提取溶剂的色谱图无论在出峰数目还是分离度上均优于其他两种溶剂的色谱图,因此选择水作为提取溶剂。在提取方式方面,选择了超声提取法和回流提取法,结果发现,2种方法提取的满山红叶色谱图差别很小,但是超声提取方法更加简便,因此选择超声的方法作为提取方法。
本实验对于色谱条件的确定,考察了色谱柱、检测波长、流动相系统,流速、柱温对满山红叶指纹图谱的影响。在色谱柱方面,选了Shim-Pack XR-ODSⅤ(2.0 mmi.d×150 mm)、Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)和YMC-Pack ODS-A(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,结果表明样品在Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)和YMC-Pack ODS-A(4.6 mm×250 mm,5μm)中不能达到分离要求,而在Shim-Pack XR-ODSⅤ(2.0 mmi.d×150 mm)色谱柱中不仅出峰快、数目多而且分离度符合要求,所以选择Shim-Pack XR-ODSⅤ(2.0 mmi.d×150 mm)色谱柱作为该实验色谱柱。
在检测波长方面,用二极管阵列检测器检(DAD)中200~400 nm依次扫描对照品溶液和供试品溶液,结果显示在检测波长297 nm处2个样品均有最大吸收,色谱图信息丰富,杜鹃素峰高较高,所以选用297 nm为检测波长。在流动相系统方面,选取不同种类有机相(甲醇、乙腈)和不同成分水相(0.3%甲酸水溶液、0.3%醋酸水溶液)构成的流动相系统对供试品溶液色谱峰分离的影响,筛选乙腈-0.3%甲酸水溶液、甲醇-0.3%甲酸水溶液、甲醇-0.3%醋酸水溶液等流动相系统,结果显示,乙腈-0.3%甲酸水溶液流动相系统不利于样品的分离,出峰数目稀少且分离度不好,甲醇-0.3%甲酸水溶液和甲醇-0.3%醋酸水溶液流动相系统对样品分离差别不明显,但是甲醇-0.3%甲酸水溶液流动相系统色谱图信息更丰富,分离度更好,故确定该流动相系统作为该实验检测的流动相。在流速方面,选择了0.1 mL·min-1、0.2 mL·min-1、0.25 mL·min-1进行筛选。结果表明,用0.1 mL·min-1流速检测色谱峰出峰不完全,用0.25 mL·min-1流速检测色谱峰分离度不好,用0.2 mL·min-1流速检测色谱峰出峰数目完全,分离度较好,故确定流速为0.2 mL·min-1。在柱温方面,对25℃、30℃、35℃柱温进行筛选。结果表明升高柱温,分离效果变差,因此确定了25℃作为检测柱温。
15批满山红叶的指纹图谱整体相似度范围0.986~ 0.999,均>0.9,相似度良好,15批满山红叶中杜鹃素含量RSD为0.11%,表明其含量没有明显差异,但是聚类分析结果将15批满山红叶分为四类,且10个共有峰峰面积的RSD范围6%~30%,说明杜鹃素的含量对其整体含量变化影响很小,其他化学成分含量变化起主要作用,初步分析应该与满山红中草药产地、生长环境、采摘时间、放置条件和放置时间等有关。
本研究运用高相液相色谱分析法,建立了满山红叶的指纹图谱,该指纹图谱可以全面展现满山红叶化学成分的特点,适用于因产地、批次、生长环境等因素的不同,出现的质量不均一的满山红叶。该方法简便易行,指纹峰分离度好,具有较高的可信度,为后续满山红叶的研究开发提供科学依据。
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普通的碗可以放进微波炉吗,行业资讯玻璃市场需求很难持续向好!,行业资讯保鲜剂结合低压静电场处理对红梅杏贮藏品质的影响及其相关性分析(一)食用槟榔卤水返白及抑制技术研究(二)黑龙江即将出台建筑65%+节能设计标准,行业资讯提高门窗节能效果怎么做?,行业资讯如何去除玻璃上的油漆 怎么去掉玻璃上的漆,行业资讯玻璃栈道门票多少钱 白石山玻璃栈道门票多少,行业资讯工程玻璃的钢化炉要多少钱 做玻璃用的钢化炉有哪几种,行业资讯中空玻璃遮阳系数的标准值是多少 中空LOW彩色夹胶玻璃惊艳到没朋友,赶紧来看看吧!,行业资讯明框和隐框玻璃幕墙区别 玻璃幕墙技术规范,行业资讯玻璃阳光房一般造价多少 20平方阳光房的造价,行业资讯湖北省市场监管局启动首个“百姓点检日”活动卢卢娃童装 五一T恤穿搭就这样穿!2024年北京数字经济核心产业统一社会信用代码赋码量增长超三成琉璃和普通的玻璃有什么区别 水晶和玻璃的区别是什么,行业资讯湖北武汉:检查市场“作弊秤”二硫化碳中7种苯系物(TVOC)混合溶液标准物质:全面检测TVOC新基准透明玻璃在晚上为什么可当镜子用 玻璃做成镜子工序是什么,行业资讯广西梧州:开展食盐安全专项检查《绿色食品 农药使用准则》的发展变化及特点分析(一)幕墙玻璃的种类 玻璃幕墙有几种,行业资讯玻璃电视背景墙好用吗 玻璃电视背景墙颜色如何选择,行业资讯广西崇左:化妆品科普进校园文远知行宣布与Uber扩大战略合作,Robotaxi服务将覆盖全球15座新增城市五一假日 穿上豆豆衣橱新品 时尚有型北京门头沟:开展校园周边食品安全检查玻璃磨边机类型 什么是玻璃磨边机,行业资讯河北沙河计划关停4条玻璃产线,行业资讯隔音玻璃的原理是什么 双层隔音玻璃价格,行业资讯马拉丁新品裙装 轻快温柔 奔赴美好初夏久岁伴2025新品系列 绘就烂漫夏日广东深圳推出十大举措提振消费 营造放心消费环境水中硫酸盐溶液标准物质:高纯标物,水质检测精准可靠玻璃有哪些品种 普通平板玻璃与浮法玻璃的区别,行业资讯玻璃幕墙检验都包含哪些内容啊 玻璃幕墙现场检验都做些什么内容,行业资讯ITCPE 睿恩化工丨全场景数码浆料解决方案普通平板玻璃与浮法玻璃有什么不同 玻璃品种有哪些,行业资讯解淀粉芽孢杆菌发酵的3种水豆豉的营养成分、溶栓及抗氧化活性(一)LAFULAI 用简约魔法 解锁童年N种快乐模式什么是烤漆玻璃 烤漆钢化玻璃背景墙有气泡怎么办,行业资讯在玻璃瓶上画画应该用什么颜料 怎样在玻璃瓶上涂颜料,行业资讯玻璃烧制流程是什么 玻璃是怎么制成的,行业资讯镀膜玻璃主要有几种类型 镀膜玻璃的主要生产方法,行业资讯太子参醇提物的肠道益生及增强抗氧化作用(一)关于对《猪尿中沙丁胺醇的测定》地方标准公开征求意见的通知钢窗安装玻璃如何使用玻璃卡子 双开式玻璃门想改成向外单侧开应该如何固定,行业资讯表没食子儿茶素没食子酸酯稳定性研究(三)天津:严禁新增钢铁、焦化、平板玻璃等产能,行业资讯“发电玻璃”中国造,挂在墙上的油田,行业资讯最后三天!伟业计量助学基金项目即将结束埃及发布“午餐肉”标准草案货物表现近强远弱,预示现货将要趋弱?,行业资讯2018上半年 陶瓷、玻璃制品制造业利润164.81亿元,行业资讯特种钨合金成分分析标准物质研制(一)高效酶提取鸡肺明胶及其结构与性质的研究(一)钢化玻璃与普通玻璃在外观上的区别 怎样从外观辨别钢化玻璃与普通玻璃,行业资讯印度营养强化食品强化营养素含量规定双层玻璃杯有什么好处 好的双层玻璃杯要具备哪些优点,行业资讯如何在玻璃上绘画 想在玻璃瓶上画画应该用什么颜料,行业资讯内酯豆花制备工艺的响应面法优化(二)白酒和黄酒中生物胺的高效液相色谱分析法(一)变色玻璃为什么能变色 给玻璃上颜色的方法,行业资讯特种钨合金成分分析标准物质研制(二)基于气相离子迁移谱技术分析杜仲叶茯砖茶加工过程中挥发性成分(三)建筑节能技术是指哪些?,行业资讯门窗到底是哪里能量损耗了?,行业资讯玻璃:建议逢低短多为主,行业资讯谷氨酸脱羧酶在枯草芽孢杆菌中的表达及应用(三)杀菌工艺对蓝莓果汁品质的影响(二)做玻璃用的钢化炉有哪几种 玻璃钢化炉大概怎么操作,行业资讯绿茶山药酸奶的研制(二)食用菌对鸭肉乳化肠冷藏过程中理化品质与安全特性的影响(一)镜子一面透光一面不透光是什么原因 为何玻璃透光,行业资讯盐渍辣椒真菌多样性分析(二)艺术玻璃拼镜背景墙怎么安装 艺术玻璃拼镜做背景墙好吗,行业资讯河南省计量科学研究院济源工作站成立专家审查通过《常德地区再生稻栽培技术规程》团体标准建筑幕墙的防火设计规范,行业资讯玻璃有哪些安装方法 玻璃幕墙的施工工艺,行业资讯邯郸计量测试所起草两项地方计量技术规范将在全省范围内实施香港食安中心在醉鸡样本检出沙门氏菌中空玻璃设备常见问题及解决办法 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